致敏试验
致敏试验
具有致敏作用的化学物经一定途径进入机体，与组织蛋白结合形成完全抗原，刺激免疫活性细胞产生致敏淋巴细胞或体液抗体；经1~2周致敏期，使体内免疫反应得到充分发展，形成一定数量的致敏淋巴细胞或特异抗体。当再次接触（激发）时使机体对该化学物产生感受性增高的状态，以一定的异常形式表现
致敏试验与刺激试验的区别
刺激试验是一个局部的炎症反应，而致敏是全身免疫系统的反应，属于细胞免疫应答
应用范围举例：
常用测试方法
Common test methods
豚鼠最大剂量法（GPMT） | |
封闭式贴敷法（Buehler 试验） |
局部淋巴结试验法（LLNA） |
其中豚鼠最大剂量法（GPMT）和封闭式贴敷法（Buehler试验）是最常用的、生物安全性评价中使用率最高的两种方法。
豚鼠最大剂量试验是最敏感的方法，欧洲国家使用此方法较广泛；
封闭式贴敷试验适用于局部产品，美国常用此方法。
局部淋巴结试验（LLNA）被经济与合作发展组织接受作为当前豚鼠试验的唯一替代方法，该法对动物保护方面也有所改善，也被认可用于化学物致敏活性的检测。
测试标准
testing standard
常见测试标准：
医疗器械生物学评价 第10部分：刺激与迟发型超敏反应试验 ISO 10993-10:2010 | |
医疗器械生物学评价 第10部分:刺激与皮肤致敏试验 GB/T 16886.10-2017 |
测试步骤
Test Step
致敏试验-豚鼠最大剂量法（GPMT）
试验原理：单一化学物采用豚鼠最大剂量试验，对材料在试验条件下使豚鼠产生皮肤致敏反应的潜能做出评定。
1
准备动物
2
预试验
预试验目的：为了确定主试验中所用试验样品的浓度。
确定主试验中所用实验样品的浓度
为主试验的局部诱导阶段所选择的最高浓度应仅导致轻度红斑，不产生其他有害作用
为主试验的激发阶段选择的最高浓度应不使动物产生红斑
3
主试验
3.1 动物分组
每种试验样品应至少使用10只动物，对照组至少使用5只动物。
10只试验动物和5只对照动物如全部呈阴性反应，则再进行试验也未必会出现阳性反应。
但是，如出现任何疑似反应时，应进行再激发，如仍有疑似反应，则要重新进行试验，最少采用20只试验动物和10只对照动物。
3.2 皮内诱导阶段->局部诱导阶段->激发阶段
按下图所示（A、B和C），在每只动物去毛的肩胛骨内侧部位成对皮内注射0.1mL
结果评价
evalsuation of the results
结果评价
对照组动物评分小于1，试验组评分≥1时，提示为致敏
对照组动物评分≥1，实验组反应超过对照组中最严重的反应，认为致敏
如试验组动物出现反应的动物数多于对照组动物，但反应强度并不超过对照组，可能需要在首次激发后1周~2周进行再次激发，以明确反应